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主營產(chǎn)品:分光光度計,紫外可見分光光度計
紫外可見分光分度計吸光度范圍及誤差影響
點擊次數(shù):15302  更新時間:2022-11-07
   紫外可見分光分度計具有靈敏度高、操作簡便、快速等優(yōu)點,是生物化學實驗中常用的實驗方法。許多物質(zhì)的測定都采用分光光度法。在分光光度計中,將不同波長的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時,便可得到與不同波長相對應(yīng)的吸收強度。
  紫外可見分光分度計的吸光度范圍應(yīng)該是在0.3-0.7之間,一般在0.2-0.8的范圍里準確。在分析過程中,很多人都是做一條標準曲線,然后去測定樣品,很少有人關(guān)心誤差方面的問題。
  在分光分析中,化學條件引起的誤差比較大,有關(guān)吸光度測量的誤差,很多人都從書上看的,認為吸光度在0.2-0.8之間誤差小,在0.434處最小,但不是特清楚理論根據(jù)。還有一個問題,如果吸光度在2.0,難道我們就去稀釋樣品,讓其吸光度在0.2-0.8的范圍內(nèi)嗎?反之,如果吸光度在0.02,那我們是不是要濃縮樣品呢?
  對此有兩種不同的看法:
  1.如果吸光度不在0.2-0.8之間,我們要去稀釋或濃縮樣品來進行測量;
  2.如果吸光度不在0.2-0.8之間,直接進行測量,因為稀釋或濃縮樣品產(chǎn)生的誤差遠遠大于直接測量吸光度產(chǎn)生的誤差。
  在分光光度計中,透射比的標尺是均勻的。吸光度與透射比為負對數(shù)關(guān)系,所以吸光度的標尺刻度是不均勻的。因此,對于同一臺儀器,讀數(shù)的波動對透射比來說,應(yīng)基本為一定值;而對吸光度來說,它的讀數(shù)則不在為定值。由分光光度計讀數(shù)標尺上吸光度與透射比的關(guān)系可以看出,吸光度越大,讀數(shù)波動所引起的吸光度誤差也越大。
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